品牌 | CNtest中檢維康 | 供貨周期 | 現貨 |
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主要用途 | 測定豬血清中豬藍耳病毒 | 應用領域 | 生物產業,綜合 |
【預期用途】
本試劑盒主要目的是測定豬血清中豬藍耳病毒抗
體,可用于評估感染豬的血清學診斷以及豬藍耳病毒
疫苗免疫狀況分析。
【檢驗原理】
本試劑盒應用固相酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
原理,由包被有高純度的豬藍耳病毒抗原的微孔反應
板、辣根過氧化物酶標記的抗豬 IgG 及其它試劑配套
組成。其反應機理為包被抗原與樣本中的 PRRSV-Ab
結 合 , 再 與 酶 標 抗 豬 IgG 抗 體 形 成 “ 包 被 抗 原
+PRRSV-Ab+酶標抗豬 IgG 抗體"復合物,加入顯色劑,
通過酶催化反應顯色。顯色深淺與 PRRSV-Ab 的量成
正比,當樣本反應顯色后,經酶標儀檢測所得結果超
過設定的臨界值時結果判為陽性,即表明免疫產生了
抗體或有自然感染存在。
【自備器材】
1.酶標儀,雙波長 450/630 nm 濾光片
2.微量移液器(單道 10-100 μl、0.5-10 μl、多道 30-300
μl)
3.水浴箱或恒溫箱
4.微量振蕩器
5.一次性槍頭(10 μl,200 μl)
6.去離子水
【樣本要求】
1.本試劑檢測的樣本為豬血清,樣本應無菌采集,2 ℃
-8 ℃貯存應不超過一周,長期應在-20℃以下保存。
2.避免使用嚴重溶血、有沉淀物、含懸浮纖維蛋白及
污染長菌的血清樣本。
【實驗準備】
1.試劑盒組分回溫平衡:試劑盒組分在實驗前,先取
出置室溫 30 min,可以獲得最佳結果。
2.樣本稀釋:用試劑盒提供的樣本xishi液將樣本作
40 倍稀釋(例:將 5 μl 樣本加至 195 μl 樣本xishi液中)。
3.配制洗滌液:將試劑盒所提供濃縮洗滌液直接用去
離子水稀釋 10 倍(例:將 10 ml 洗滌液加入 90 ml 去
離子水中)。若 10 倍濃縮洗滌液出現結晶,屬正常現
象,放置 37 ℃至溶解后即可。
【檢驗方法】
1. 加樣:根據樣本數量,取所需板條,檢測時,設陰、
陽性對照各 2 孔,分別加入不用稀釋的陰、陽性對照
血清 100 μl 于相應孔中(可不設空白對照)。其余為
樣本孔,每孔加 100 μl 用樣本xishi液稀釋好的樣本。
2. 溫育:加樣后,蓋上蓋板膜,置 37 ℃溫育 30 min。
3. 洗板:甩去孔內液體,用洗滌液注滿反應板孔,靜
置 10 s,直接甩出,洗滌 3 次,最后一次洗滌后吸干
板內液體。
4. 加酶:每孔加酶標記物 100 μl。
5. 溫育:加好酶標記物的反應板蓋好蓋板膜,置 37 ℃
溫育 30 min。
6. 洗板:同步驟 3。
7. 顯色:每孔加顯色劑 100 μl,振蕩混勻,37 ℃避光
反應 10 min。
8. 終止:每孔加終止液 50 μl,振蕩 10 s,充分混勻,
終止后即讀數。
9. 讀數:以 450 nm/ 630 nm 雙波長檢測,讀取各孔吸
光度值(OD 值)。充分混勻,終止后即讀數。
【注意事項】
1.請在使用試劑盒之前,仔細閱讀說明書。
2.請不要使用過期的試劑盒組分,不要將不同批次的
組分混合使用。
3.本試劑盒應按含有傳染性材料對待,試驗廢棄物應
經 121 ℃高壓蒸汽滅菌 30 min,或用 5.0 g/L 次氯酸鈉
等消毒劑處理 30 min 后廢棄。
4.未用完的微孔板須放回有干燥劑的鋁箔袋并密封
2 ℃-8 ℃保存。未用完的液體試劑應蓋好瓶蓋,與其
它配套組份放入試劑盒中于 2 ℃-8 ℃避光保存。
5.應用微量移液器加入樣本及試劑,并經常校對其準
確性。
6.加洗滌液時應做到滿而不溢,防止孔口有游離酶不
能洗凈或各孔間的交叉污染。
7.終止液有腐蝕性,若濺到皮膚或衣物上應立即用大
量清水沖洗干凈。
【儲存條件及有效期】
于 2 ℃-8 ℃避光保存,防止冷凍,有效有效期 12
個月。
【生產日期及批號】
詳見包裝袋和外包裝盒。