非洲豬瘟檢測卡采用了快速免疫層析檢測技術,用于檢測全血、血清中的豬瘟抗體。把樣本加入到加樣孔后,與膠體金標記的CSF抗原一起沿層析膜移動。若樣品中存在抗CSF抗體時,與檢測線上的抗原結合而顯示酒紅色。如果樣品中不存在CSF抗體時,則不產生顏色反應。
非洲豬瘟檢測卡試驗流程:
1、設試劑空白對照,并于相應的微孔中加入100ulEIA緩沖液
2、確定好樣品空白對照孔,檢測樣品孔和標準品孔,分別將100ul樣品對照品(8號管)、檢測樣品和稀釋好的標準品(1-7號管)加入到相應的微孔中。
3、蓋板,4°C下溫育過夜
4、用洗滌瓶劇烈洗板,再加入稀釋洗滌液,靜置15-30秒,再*倒去孔內反應液重復洗板7次.*在吸水紙上拍干,去除殘留液滴如用自動洗板機洗板,先自動洗4次,再按上述用洗瓶手工洗3次
5、除試劑空白對照孔外,其余每孔各加100ul酶標抗體非洲豬瘟檢測卡
6、用一次性試管取所需量的顯色劑,各加100ul顯色劑于微孔中.為了避免污染,勿將剩余試劑在倒回試劑瓶中
7、室溫避光溫育30min,加入顯色劑后溶液顏色會變成藍色,每孔各加100ul終止液,溶液顏色會變成黃色
8、擦去微孔板底部的污跡或水滴,確保微孔內溶液無氣泡產生.加入終止液后30min內于酶標儀450nm處讀取結果。
非洲豬瘟檢測卡特別注意
1、建議樣品,標準品做雙份檢測;
2、如樣品需稀釋,用EIA緩沖液稀釋;
3、保持樣品處于中性PH范圍.有機溶劑的污染會影響實驗結果;
4、收集樣品后盡快檢測.如需保存,凍存樣品,但要避免反復凍融.檢測前,將樣品解凍至室溫;
5)、只能用本試劑盒提供的洗滌液洗板.不充足的洗板會導致錯誤的結果。